Примена хромогене технике на испитивање бактеријских ендотоксина

Хромогена техника је међу три технике које такође садрже технику гел-угрушка и турбидиметријску технику за откривање или квантификацију ендотоксина из грам-негативних бактерија коришћењем амебоцитног лизата екстрахованог из плаве крви потковице (Лимулус полипхемус или Тацхиплеус тридентатус).Може се класификовати као хромогени тест крајње тачке или кинетичко-хромогени тест заснован на посебном принципу есеја.

Принцип реакције је следећи: лизат амебоцита садржи каскаду ензима серин протеазе (проензима) који се могу активирати бактеријским ендотоксинима.Ендотоксини активирају проензиме да производе активиране ензиме (назване коагулаза), потоњи катализују цепање безбојног супстрата, ослобађајући жуто обојени производ пНА.Ослобођена пНА се може фотометријски мерити на 405 нм.А апсорбанца је у позитивној корелацији са концентрацијом ендотоксина, тада би концентрација ендотоксина могла да се квантификује у складу са тим.


Време објаве: 29.09.2019